Resumo: Várias espécies fúngicas estão associadas às sementes de arroz, destacando-se Bipolaris oryzae, por causar a morte de plântulas e redução da produção. Assim, o objetivo do trabalho foi estudar o potencial de combinações de rizobactérias pré-selecionadas [DFs-C4 (DFs185/DFs416/DFs418) e DFs-C5 (DFs306/DFs416/DFs418)], quando comparado ao uso destas de forma individual (DFs185, DFs306, DFs416, DFs418), além de DFs223, avaliando o efeito na incidência e transmissão de B. oryzae, incidência de fungos fitopatogênicos e no crescimento inicial das plântulas após a microbiolização das sementes de arroz. Sementes das cultivares BRS Pelota e BRS Querência (quatro lotes cada) foram imersas em suspensão dessas bactérias ou em solução salina (testemunha) sob agitação (30 minutos a 10 ºC). Foi avaliada a incidência de fungos em papel filtro e a transmissão do patógeno em vermiculita esterilizada e câmara úmida a 25 ± 2 ºC. Após 15 dias foram avaliados a severidade dos sintomas e o crescimento vegetal. Para as duas cultivares, os melhores tratamentos foram DFs185 e DFs306, reduzindo a incidência de fungos, incluindo B. oryzae, assim como a transmissão desse patógeno para plântulas, resultando em aumento no comprimento de plântulas. A combinação de bactérias biocontroladoras, eficientes individualmente, não resultou em menor incidência de fungos, nem redução da transmissão de B. oryzae para as plântulas ou em aumento do crescimento inicial de plântulas. Portanto, estas rizobactérias são mais eficientes quando utilizadas individualmente.

Abstract: Several fungi species are associated with rice seeds, mainly Bipolaris oryzae, since it can kill seedlings and reduce production. Thus, the objective of this research was to study the potential of pre-selected combinations of rhizobacteria [DFs-C4 (DFs185/DFs416/DFs418) and DFs-C5 (DFs306/DFs416/DFs418)], when compared to their use individually (DFs185, DFs306, DFs416, DFs418), besides DFs223, evaluating the effect on the incidence and transmission of B. oryzae, incidence of phytopathogenic fungi and in the initial growth after rice seeds microbiolization. Seeds of cultivars BRS Pelota and BRS Querência (four lots each) were immersed in suspension of these bacteria or in saline solution (control) under agitation (for 30 minutes at 10 ºC). The fungi incidence was evaluated on blotter test. The pathogen transmission was assayed in sterilized vermiculite and humid chamber at 25 ± 2 ºC. After 15 days, the severity of the symptoms and the plant growth were evaluated. For both cultivars, the best treatments were DFs185 and DFs306, reducing the fungi incidence, including B. oryzae, as well as its transmission to seedlings, resulting in seedling length increase. The combination of biocontrol bacteria, individually efficient, did not result in a lower fungi incidence, or a reduction in the transmission of B. oryzae to the seedlings or an initial increase in seedling growth. Therefore, these rhizobacteria are more efficient when used individually.

RESUMO Objetivou-se neste estudo avaliar a atividade antifúngica do extrato metanólico e frações das folhas de Randia nitida (Kunth) DC. sobre Colletotrichum truncatum (Schw.) Andrus & Moore, Rhizoctonia solani Kühn e Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary e realizar análise química e atividade antioxidante. O extrato metanólico bruto (EBM) e frações (hexânica= FHX, diclorometano= FDM e acetato de etila= FAE) foram submetidas a análise fitoquímica clássica e determinado os fenóis totais, flavonoides e atividade antioxidante. As amostras foram incorporadas, individualmente, ao meio de cultura BDA (batata-dextrose-ágar) nas concentrações de: 10, 20, 40, 80 e 160 µg mL-1 de extrato ou fração. O crescimento micelial foi avaliado quando a testemunha alcançou a borda da placa. Os resultados fitoquímicos indicaram que os flavonoides, esteroides e triterpenos são os constituintes químicos majoritários no EBM e nas frações. O teor de fenóis totais, flavonoides e a atividade antioxidante foi maior para a fração FAE e extrato EBM, seguido da fração FDM e da FHX, contudo a fração hexânica apresentou maior conteúdo de esteroides e triterpenos em relação as demais frações. Para os três fungos, as frações eficientes foram as frações FAE, FDM e FHX, respectivamente, todas na maior concentração estudada (160 µg mL-1). A maior porcentagem de inibição foi observada frente ao patógeno S. sclerotiorum, chegando a 93,75%. Conclui-se que todas as frações apresentam atividade antifúngica sobre os fitopatógenos e a fração FHX foi a mais ativa frente a Sclerotinia sclerotiorum, provavelmente pela presença de esteroides e triterpenos.

ABSTRACT This study aimed to evaluate the antifungal activity of methanol extract and fractions of leaves of Randia nitida (Kunth) DC on Colletotrichum truncatum (Schw.) Andrus & Moore, Rhizoctonia solani Kühn and Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) De Bary and perform chemical and antioxidant activity tests. Crude methanol extract (EBM) and fractions (hexane = FHX, dichloromethane = FDM and ethyl acetate = FAE) underwent classical phytochemical analysis and determination of total phenols, flavonoids and antioxidant activity. Samples were individually incorporated into PDA culture mediums (potato-dextrose-agar) at concentrations of 10, 20, 40, 80 and 160 µg mL-1 of extract or fraction. Mycelial growth was evaluated when control reached the edge of the plate. Phytochemical results indicated that flavonoids, steroids and triterpenoids are the major chemical constituents in both EBM and fractions. Total phenols, flavonoids and antioxidant activity were higher for FAE and EBM, followed by FDM and FHX; however, the latter showed higher content of steroids and triterpenoids compared to the other fractions. For C. truncatum, R. solani and S. sclerotiorum, the most efficient fractions were respectively FAE, FDM and FHX, all of them in the highest concentration (160 µg mL-1). The highest inhibition rate was observed against S. sclerotiorum, reaching 93.75%. We concluded that all fractions have antifungal activity on the plant pathogens, being FHX the most active against S. sclerotiorum, which might have been due to the presence of steroids and triterpenes.

No Pantanal Sul, as araras-azuis (Anodorhynchus hyacinthinus), espécie em extinção, escolhem preferencialmente o manduvi (Sterculia apetala) como local de nidificação devido principalmente às características físicas da árvore. Porém, a composição química da madeira também pode interferir nesta seleção. Os objetivos deste trabalho foram determinar as principais classes de substâncias químicas presentes nas cascas de S. apetala em duas épocas do ano e seu potencial antifúngico. As cascas de árvores, com e sem a presença de ninhos de A. hyacinthinus, foram coletadas em janeiro (período de chuvas) e agosto (período de seca) de 2012. Por meio das análises fitoquímicas e quantificação de flavonóides, foram selecionadas amostras de uma árvore com ninho e outra sem ninho para determinar seu potencial antifúngico frente à Trichoderma sp. através da porcentagem de inibição do crescimento micelial (PIC). A investigação fitoquímica do extrato etanólico das cascas revelou a predominância de compostos fenólicos e flavonóides. O teor médio de fenóis totais foi superior para as amostras com ninho, em relação às sem ninho, nos dois períodos de coleta e, para flavonóides, os valores foram superiores em janeiro para a amostra com ninho e em agosto, para sem ninho. As amostras selecionadas apresentaram potencial antifúngico, sendo que com ninho, coletada em agosto (auge do período de reprodução das araras-azuis), resultou em um PIC de 51,3%, valor relacionado aos flavonóides e as cumarinas, fator que pode influenciar o sucesso reprodutivo da arara azul e outras espécies de aves nesta região. Este trabalho foi o primeiro a identificar os componentes químicos da casca do tronco de S. apetala.

In the Southern Pantanal, the hyacinth macaw (Anodorhynchus hyacinthinus), an endangered species, often chooses the manduvi tree (Sterculia apetala) as a nesting site, because of its physical properties. In addition, the chemical composition of the wood may also contribute to a nesting selection by the hyacinth macaws. The objective of this study was to determine the main chemical components of S. apetala bark for two seasons, and evaluate its fungicidal potential. Bark samples from S. apetala trees with and without nests of A. hyacinthinus were collected in January (wet season) and August (dry season) of 2012. The inhibition of mycelium growth (MGI) from tree samples with and without nests were assessed using a phytochemical analysis to evaluate their antifungal activity against Trichoderma sp. Phytochemical analysis confirmed the presence of phenolic compounds and flavonoids. In both seasons, samples obtained from nested trees had higher content of total phenols than those collected from non-nested trees. The average content of total flavonoids was higher in January for samples with nest and in August for samples without nest. All selected samples showed antifungal activity, and those with nest collected in August (peak of hyacinth macaw breeding) resulted in an MGI of 51.3%. Therefore, this percentage, related to the content of flavonoids and the presence of coumarins, may influence the reproductive success of hyacinth macaws and other species of birds, in this region. This is the first chemical study report with the stem bark of S. apetala.

Bipolaris oryzae e Gerlachia oryzae causadores, respectivamente, da mancha parda e da escaldadura do arroz são principalmente disseminados por sementes. Objetivou-se com esse trabalho avaliar o potencial da microbiolização de sementes para a redução da transmissão destes patógenos das sementes para as plântulas usando as bactérias DFs185 (Pseudomonas synxantha), DFs223 (P. fluorescens), DFs306 (não identificado) e DFs418 (Bacillus sp.). Duas amostras de sementes portadoras de B. oryzae e G. oryzae foram imersas em suspensão dessas bactérias, sendo a testemunha imersa em solução salina (A540 = 0,5). Após agitação (30 min./10 ºC), 400 sementes foram submetidas ao teste de sanidade pelo método do papel de filtro e o resultado indicou que o isolado DFs223 destacou-se na redução de B. oryzae e de G. oryzae nos dois lotes de sementes avaliados. Sementes tratadas conforme descrito foram dispostas em vermiculita autoclavada e a transmissão dos patógenos e promoção de crescimento avaliados após 21 dias de incubação em mesmas condições. Os isolados DFs185 e DFs306 reduziram a transmissão de ambos os patógenos, porém o isolado DFs306 foi o que proporcionou maiores incrementos de crescimento. Avaliação de antibiose in vitro mostrou que os isolados inibiram o crescimento micelial de ambos os patógenos, exceto DFs306. Pode se afirmar que estas bactérias apresentam potencial para tratar sementes visando ao controle de doenças transmitidas por estas.

Bipolaris oryzae and Gerlachia oryzae, which cause rice brown spot and leaf scald, respectively, are mainly disseminated by seeds. The aim of this study was to evaluate the potential of seeds microbiolization to reduce transmission of these pathogens to seedlings by using the bacteria DFs185 (Pseudomonas synxantha), DFs223 (P. fluorescens), DFs306 (unidentified) and DFs418 (Bacillus sp.). Seeds naturally infested/infected with both pathogens were immersed in suspension of these bacteria (A540 = 0.5) individually or in saline solution (control treatment). After 30 minutes of agitation at 10 ºC, 400 seeds were submitted to a sanity test through the blotter method and the isolate DFs223 was the best to reduce the incidence of B. oryzae and G. oryzae in both seed lots evaluated. Seeds treated like above were sowed in sterilized vermiculite. Seed transmission and growth promotion were recorded after 21 days of incubation in the same conditions. The isolates DFs185 and DFs306 reduced transmission of both pathogens, although the isolate DFs306 was the one wich gave the greatest growth increases. The evaluation of the in vitro antibiosis showed that isolates inhibited the mycelial growth of both pathogens, except DFs306. It is possible to affirm that these bacteria have the potential to be used as a seed treatment for seed-borne disease control.

Avaliou-se o potencial de oito isolados de rizobactérias que eficientemente controlam doenças fúngicas em arroz [DFs185 (Pseudomonas synxantha), DFs223 (P. fluorescens), DFs306 (não identificado), DFs416, DFs418 e DFs419 (Bacillus sp.), DFs422 (Bacillus subtilis), DFs471 (Stenotrophomonas malthophilia)] no controle de Meloidogyne graminicola, in vitro, e em arroz irrigado em casa de vegetação. As rizobactérias DFs185, DFs223, DFs306 e DFs416 se destacaram na redução da eclosão e no aumento da mortalidade de J2 de M. graminicola. Todas as rizobactérias foram capazes de produzir pelo menos um composto associado ao biocontrole de nematoides (quitinases, fosfatases, lipases, proteinases e sideróforos). O número de galhas e de ovos de M. graminicola em plantas de arroz foi reduzido em relação às plantas vindas de sementes não microbiolizadas. O fator de reprodução do nematoide foi reduzido, em média, em 29%, com destaque para as rizobactérias DFs185 e DFs223 que proporcionaram redução de 35%. Esse resultado é significativo, porque são rizobactérias que também controlam doenças fúngicas.

The potential of eight rhizobacteria that effectively control fungal diseases in rice [DFs185 (Pseudomonas synxantha), DFs223 (P. fluorescens), DFs306 (not identified), DFs416, DFs418 e DFs419 (Bacillus sp.), DFs422 (Bacillus subtilis), DFs471 (Stenotrophomonas malthophilia)] was evaluated for the control of Meloidogyne graminicola in vitro and in irrigated rice in the greenhouse. The rhizobacteria DFs185, DFs223, DFs306, DFs416 and DFs419 exceeded in reducing hatching and in increasing the mortality of M. graminicola J2. All rhizobacteria were able to produce at least one compound associated with the biocontrol of nematodes (chitinasis, phosphatases, lipases, proteinasis and siderophores). The number of eggs and galls of M. graminicola in rice plants was reduced compared to plants from seeds not microbiolized. The nematode reproduction factor was reduced on average by 29%, highlighting rhizobacteria DFs185 and DFs223 that reduced 35%. This result is significant because the rhizobacteria also control fungal diseases.

O potencial dos isolados DFs185 (Pseudomonas synxatha), DFs223 (Pseudomonas fluorescens), DFs306 (não identificado), DFs416, DFs418 e DFs419 (Bacillus sp.), DFs422 (Bacillus subtilis) e DFs471 (Stenotrophomonas maltophilia) foi avaliado para o controle da mancha-parda (Bipolaris oryzae) e da escaldadura (Gerlachia oryzae) do arroz. Para tanto, sementes da cultivar El Passo L144 foram imersas em suspensão (10(7) a 10(8) UFC/mL) de cada um dos isolados, agitadas por 30 min a 10ºC e semeadas em vasos, sendo utilizado o delineamento inteiramente casualizado com quatro repetições. Foram utilizadas duas testemunhas: uma tratada com solução salina e outra com solução salina mais fungicida (Carboxin+Thiran). Realizaram-se dois ensaios para cada um dos patógenos, inoculados nas plantas por aspersão, e avaliados quanto à severidade aos 7, 14 e 21 dias após a inoculação calculando a área abaixo da curva de progresso da doença. Para mancha-parda, no primeiro ensaio, o melhor desempenho foi proporcionado pelos isolados DFs185, DFs223 e DFs306 que apresentaram 80, 86 e 70% de redução da severidade. No segundo ensaio, o isolado DFs306 foi o mais eficiente deles, com redução na severidade da doença chegando a 74% em relação à testemunha, sendo que os isolados DFs223, DFs185 e DFs306 proporcionaram incremento na massa de grãos em 74, 70 e 59%, respectivamente. Para o controle da escaldadura, no primeiro ensaio, os isolados que apresentaram melhores resultados foram DFs416 e DFs418 com 65 e 59% de controle, respectivamente. No segundo ensaio, se destacaram os isolados DFs416 e DFs185 reduzindo a severidade da doença em 64 e 60%, respectivamente sem incrementar a produção.

The potential of isolates DFs185 (Pseudomonas synxatha), DFs223 (Pseudomonas fluorescens), DFs306 (unidentified), DFs416, DFs418 and DFs419 (Bacillus sp.), DFs422 (Bacillus subtilis) and DFs471 (Stenotrophomonas maltophilia) was evaluated for the control of rice brown spot (Bipolaris oryzae) and leaf scald (Gerlachia oryzae). Rice seeds cv. El Passo L144 were immersed in a suspension (10(7) a 10(8) CFU/mL) of each of the isolates, agitated for 30 min at 10ºC and sowed in pots, in complete randomized design with four replications. Two controls were used: one with seeds treated with saline solution, and the other with saline solution plus fungicide (Carboxin+Thiran). Two assays for each of the pathogens were carried out. Plants were inoculated by spraying and their disease severity was evaluated at 7, 14 and 21 days after inoculation for the calculation of the area under disease progress curve. The best result for brown spot biocontrol in the first assay was provided by isolates DFs185, DFs223 and DFs306, which presented 80, 86 and 70% of control. In the second assay, isolate DFs306 was the most efficient, with reduction in disease severity reaching 74% in relation to control. The isolates DFs223, DFs185 and DFs306 provided a rise in grain yield of 74, 70 and 59%, respectively. For the control of leaf scald, in the first assay, the isolates that presented the best results were DFs416 and DFs418, which showed 65 and 59% of control, respectively. In the second experiment, isolates DFs416 and DFs185 reduced the disease severity, respectively, by 64 and 60%, without increasing the yield.

Isolados de Pseudomonas veronii (DFs513), Bacillus spp. (DFs093 e DFs348), Bacillus cereus (DFs769), Rodhococcus fascians (DFs843 e DFs912) e Pseudomonas fluorescens (DFs831 e DFs842), selecionados para o controle de Xanthomonas axonopdis pv. phaseoli, bem como a combinação de alguns destes isolados bacterianos, foram avaliados quanto a possível influência sobre a transmissão de Colletotrichum lindemuthianum para plântulas de feijão, a partir de sementes naturalmente infectadas e/ou infestadas. Sementes de dois lotes foram microbiolizadas com suspensões dos biocontroladores, sendo que no primeiro ensaio, em rolo de papel, realizou-se a semeadura com oito repetições de 25 sementes, incubadas a 20 ± 2°C. Os percentuais de germinação das sementes e incidência do patógeno foram avaliados. Em um segundo ensaio avaliou-se a transmissão do patógeno para a planta em ensaio conduzido em substrato esterilizado, incubadas por 10 dias. Realizaram-se contagens diárias das plântulas emergidas, incidência do patógeno, massa seca das folhas e raízes. Para a antibiose in vitro, um isolado de C. lindemuthianum foi confrontado com os isolados biocontroladores. Todos os tratamentos proporcionam aumentos de massa foliar e radicular, tanto considerando o número total quanto por planta. Os isolados, DFs831, DFs842, DFs843 e DFs912 produzem antibióticos em testes in vitro. Todos os tratamentos possibilitaram a redução da transmissão de C. lindemuthianum para plantas em pelo menos um dos ensaios. Porém, o isolado DFs912 (Rhodococcus fascians) destaca-se, por apresentar em todos os experimentos reduções da transmissão que variam de 40 a 67%.

Isolates of Pseudomonas veronii (DFs513), Bacillus spp. (DFs093 and DFs348), Bacillus cereus (DFs769), Rodhococcus fascians (DFs843 and DFs912) and Pseudomonas fluorescens (DFs831 and DFs842), selected for Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli control, and a combination of some of these bacteria isolates, were evaluated for possible influence on Colletotrichum lindemuthianum transmission from naturally infected and/or infested bean seeds to seedlings. In the first trial, using the paper roll method, seeds were sown in eight replications of 25 seeds that were incubated at 20 ± 2°C. Germination percentage and pathogen incidence were evaluated. In the second trial, pathogen transmission to seedlings was evaluated in sterile substratum and incubated for 10 days. Daily emerged seedlings, pathogen incidence, leaf and root dry mass were determined. An isolate of C. lindemuthianum was used against the biocontroller isolates to evaluate in vitro antibiosis. All of the treatments reduced C. lindemuthianum transmission to seedlings in at least one of the trials. However, isolate DFs912 (Rhodococcus fascians) was shown to be important and presented reductions in transmission that varied from 40 to 67% in all of the experiments. All the treatments promoted leaf and root mass increase on total number or on the number per plant. Results in vitro showed that isolates DFs831, DFs842, DFs843 and DFs912 produced antibiotic compounds.

Objetivou-se avaliar o efeito de oito isolados bacterianos pré-selecionados de Pseudomonas synxatha, P. fluorescens, Bacillus subtilis, Bacillus sp. e Stenotrophomonas malthophilia no controle da queima-das-bainhas do arroz, causada por Rhizoctonia solani. Sementes da cultivar El Passo L144 foram imersas em suspensão (A540=0,5) de cada um dos isolados e agitadas por 30 min a 10ºC. Sementes imersas somente em solução salina e em salina mais fungicida (Carboxin + Thiran) foram utilizadas como testemunhas. Foram semeadas 10 sementes por vaso, em quatro repetições, dispostas em delineamento completamente casualizado. Foram realizados três ensaios, sendo que no primeiro foi possível selecionar três isolados como promissores, com reduções na severidade da doença atingindo 50, 33,3 e 16,7 %, respectivamente. Estes isolados foram utilizados nos ensaios posteriores, instalados em casa de vegetação e conduzidos até o ponto de colheita, onde foi possível observar o efeito biocontrolador propiciado, principalmente, pelo isolado de P. fluorescens DFs223, com reduções significativas na severidade da doença chegando a 88 e 91,7% no segundo e terceiro ensaios respectivamente. Em ambos os ensaios, houve incremento tanto do número de panículas quanto do número de perfilhos e da massa seca de raízes em até 42,8, 81,2 e 113% respectivamente, nas plantas tratadas com o isolado de P. fluorescens DFs223.

Eight pre-selected bacterial strains were evaluated for control of rice sheath blight caused by Rhizoctonia solani, Pseudomonas synxatha, P. fluorescens, Bacillus subtilis, Bacillus sp. and Stenotrophomonas malthopilia. Rice seeds cv. El Passo L144 were treated by immersion in a bacterial suspension (A540=0.5) of each isolate under agitation at 10ºC for 30 min. Seeds immersed in saline solution and in saline plus fungicide (Carboxin + Thiran) were used as control. Ten seeds per pot were used, in four replications, in a completely randomized design. Three assays were performed, and in the first it was possible to select the three strains which reduced the severity of the disease, reaching 50, 33.3 and 16.7%, respectively. These isolates were used in the two last assays, which were maintained in greenhouse until the harvesting stage, where it was possible to observe the biocontrol effect, mainly by the strain of P. fluorescens DFs223, with significant reduction in the disease severity, reaching 88 and 91.7% in the second and third assays, respectively. There was an increase in the number of panicles, as well as in the number of tillers and dry mass of roots, reaching to 42.8, 81.2 and 113 % respectively, in plants treated with this isolate in both assays.